Miért az alamar blue assay?
Pontszám: 4,1/5 ( 44 szavazat )Az alamarBlue egy sejtproliferációs teszt, amely gyors, érzékeny és gazdaságos módot biztosít a sejtproliferáció és a citotoxicitás kvantitatív mérésére különböző emberi és állati sejtvonalakban . Használható mikobaktériumok, baktériumok és gombák vizsgálatára is.
Mire használható az Alamar kék?
Az alamarBlue Cell Viability Reagent egy indigó színű, nem toxikus reagens, amely kimutatja a metabolikusan aktív sejteket, és a sejtek életképességének és proliferációjának kvantitatív elemzésére szolgál .
Hogyan méri az Alamar kék teszt a sejtek életképességét?
Az AlamarBlue Cell Viability Reagent kvantitatívan méri az emlős sejtvonalak, baktériumok és gombák szaporodását . A festék tartalmaz egy oxidációs-redukciós (REDOX) indikátort, amely fluoreszkál és megváltoztatja a színét a sejtnövekedés miatti kémiai redukció hatására.
Mi az a microplate Alamar blue assay?
A 96 lyukú Microplate Alamar Blue Assay (MABA) lehetővé teszi a replikáló Mycobacterium tuberculosis bármely törzsével szembeni gyógyszerérzékenység kvantitatív meghatározását, amelyet egy héten belül minimális költséggel kell elvégezni. ... a tuberkulózis fontos tényező az M. tuberculosis elleni gyógyszerjelöltek kifejlesztésében.
Mi az a Presto blue assay?
A PrestoBlue® egy használatra kész sejtáteresztő resazurin alapú oldat , amely sejt életképességi indikátorként funkcionál az élő sejtek redukáló erejét felhasználva a sejtek proliferációjának kvantitatív mérésére.
Alamar Blue
Mi a sejtek életképessége?
A sejtek életképességének értékelése alapvető fontosságú egy új gyógyszer vagy kezelés hatékonyságának elemzéséhez. Általában a sejtek életképessége a sejtek egészségének mértéke . A sejtekre ható szerek, például egy potenciális új gyógyszer, hatással vannak a sejt egészségére és anyagcseréjére, de eltérő mértékben.
Hogyan készítsek MTT-tesztet?
- Dobja ki a táptalajt a sejttenyészetekből. ...
- Adjon 50 µL szérummentes táptalajt és 50 µL MTT oldatot minden lyukba.
- Inkubálja a lemezt 37 °C-on 3 órán át.
- Inkubálás után adjon 150 µl MTT oldószert minden lyukba.
- Csomagolja be a tányért fóliába, és rázza rá egy orbitális rázógépen 15 percig. ...
- Olvassa le az abszorbanciát OD=590 nm-en.
Az Alamar Blue mérgező?
A resazurin vagy alamarBlue® általában nem toxikus a tipikus , a gyártó által javasolt néhány órás inkubációs idő alatt (Fields és Lancaster 1993; Zhang és mtsai 2004).
Mi okozza a proliferációt?
A sejtproliferáció az a folyamat, amelynek során egy sejt növekszik és osztódik, és két leánysejt keletkezik. A sejtproliferáció a sejtszám exponenciális növekedéséhez vezet, ezért a szövetnövekedés gyors mechanizmusa.
Hogyan készíted a Blue Alamart?
- Oldjuk fel az alamárkéket PBS-ben (pH 7,4) 0,15 mg/ml-re.
- Szűrje le és sterilizálja a resazurin oldatot egy 0,2 μm-es szűrőn keresztül egy steril, fénytől védett edénybe.
- A resazurin oldatot fénytől védve, gyakori használat esetén 4°C-on, hosszú távú tárolás esetén -20°C-on tárolja.
Hogyan csökkenthetem a kék Alamaromat?
Az Alamar Blue tehát csökkenthető NADPH-val (E o = 320 mV) , FADH-val (E o = 220 mV), FMNH-val (E o = 210 mV), NADH-val (E o = 320 mV), valamint a citokrómokkal. (E o = 290 mV és +80 mV között). Mivel az indikátorfesték elektronokat fogad be, az oxidált, nem fluoreszkáló, kék állapotból redukált, fluoreszkáló, rózsaszínű állapotba változik [9].
Hogyan teszteli a sejtek életképességét?
A sejtek életképességének mérése áramlási citometriával Általában egy membránt át nem eresztő festéket, például propidium-jodidot használnak a sérült membránokkal rendelkező elhalt vagy haldokló sejtek azonosítására, valamint egy életképességi festéket, például a calcein-AM-et az élő sejtek jelölésére.
Hogyan határozza meg a tripánkék a sejt életképességét?
Azon az elven alapul, hogy az élő sejtek sértetlen sejtmembránokkal rendelkeznek, amelyek kizárnak bizonyos színezékeket, mint például a tripánkék, az eozin vagy a propidium, míg az elhalt sejtek nem. Ebben a tesztben a sejtszuszpenziót festékkel keverik, majd vizuálisan megvizsgálják annak meghatározására , hogy a sejtek felveszik-e vagy kizárják-e a festéket.
Hogyan csökken a resazurin?
A resazurin a metabolikusan aktív sejtek aerob légzése révén rezorufinná redukálódik, és a sejtek életképességének indikátoraként használható. ... A resazurin rezorufinra való visszafordíthatatlan reakciója arányos az aerob légzéssel.
Mi mérgező a sejtekre?
A Wikipédiából, a szabad enciklopédiából. A citotoxicitás a sejtre mérgező tulajdonság. Toxikus ágensek például egy immunsejt vagy bizonyos típusú méregek, például a puffadt ágból (Bitis arietans) vagy a barna remetepókból (Loxosceles reclusa).
Miért számolja a tripánkék a sejteket?
A tripánkék az egyik vezető sejtkizáró színezék, amelyet az élő és elhalt sejtek megkülönböztetésére használnak oldatban az átfogó életképesség kiszámításához . Megfesti az elhalt sejteket azáltal, hogy áthatol a károsodott membránjukon, és az intracelluláris fehérjékhez kötődik, ami sötétkék megjelenést eredményez.
A sejtburjánzás rossz?
Azt a folyamatot, amelynek során a sejtek növekednek és osztódnak az elveszett sejtek pótlására , sejtproliferációnak nevezik. Ez egy erősen szabályozott tevékenység a normál, egészséges szövetekben.
Mi történik, ha túl sok a sejtburjánzás?
A rák ellenőrizetlen sejtnövekedés. A gének mutációi rákot okozhatnak azáltal, hogy felgyorsítják a sejtosztódást vagy gátolják a rendszer normál szabályozását, például a sejtciklus leállását vagy a programozott sejthalált. Ahogy a rákos sejtek tömege nő, daganattá fejlődhet.
Miért fontos a proliferáció?
A sejtszaporodás a fejlődést szabályozó egyik kritikus tényező. A testek és szervek fejlődéséhez az embriogenezis során minden többsejtű szervezetben többszörös sejtproliferációra van szükség. Ha azonban a sejtek rendszertelenül szaporodnak, a testek vagy szervek puszta sejttömegekké válnának.
Mi az MTT citotoxicitási vizsgálat?
Az MTT-tesztet a sejtek metabolikus aktivitásának mérésére használják, mint a sejtek életképességének, proliferációjának és citotoxicitásának indikátorát . ... Minél sötétebb az oldat, annál több az életképes, metabolikusan aktív sejt. Ezt a nem radioaktív, MTT-t alkalmazó kolorimetriás vizsgálati rendszert először Mosmann, T és munkatársai írták le.
Mi az a sejtproliferációs vizsgálat?
A sejtproliferációs vizsgálatok jellemzően az osztódásban lévő sejtek számában vagy a sejtpopulációban bekövetkező változásokat mutatják ki . A sejtproliferációs vizsgálatok alapvetően négy módszerre oszlanak: metabolikus aktivitási vizsgálatok, sejtproliferációs marker vizsgálatok, ATP koncentrációs vizsgálatok és DNS szintézis vizsgálatok.
A resazurin mérgező a sejtekre?
Az alamarBlue(®) márkanéven a sejt életképességi indikátoraként bevezetett rezazurint általában nem mérgezőnek tekintik, ha a gyártó által javasolt rövidebb inkubációs időre vonatkozó előírásoknak megfelelően használják. Problémák merülnek fel azonban, ha az expozíciós időt kiterjesztik a hosszabb távú tenyészetekre, napok nagyságrendjében.
Mi történik az MTT vizsgálatban?
Az MTT vizsgálat egy kolorimetriás vizsgálat a sejt metabolikus aktivitásának értékelésére . A NAD(P)H-függő celluláris oxidoreduktáz enzimek meghatározott körülmények között tükrözhetik a jelenlévő életképes sejtek számát. ... A sejtet át nem eresztő WST-1-nél a redukció a sejten kívül történik plazmamembrán elektrontranszport révén.
A sejt életképessége több lehet 100-nál?
A nanorészecskékkel kezelt minták sejtéletképességének általában kisebbnek kell lennie, mint a kontrollé (100%). De néha 100%-nál többet mutat.
Hogyan számolhatom meg a sejteket az MTT vizsgálathoz?
- csinálj átlagosan néhány "üres" lyukat, amelyek tartalmazzák az MTT-oldatot, de *nincs* cella. ...
- vonja ki az 1. lépésből származó háttérvezérlést a lemez összes méréséből. ...
- számítson ki egy átlagot a kontrolljára (=100%-os életképességű egészséges sejtek).