Mi a puromicin szerkezete?
Pontszám: 4,4/5 ( 45 szavazat )A puromicin egy nukleozidból áll, amely kovalensen kötődik egy aminosavhoz , utánozva az aminoacilezett tRNS-ek 3'-végét, amelyek részt vesznek az aminosavak megnyúló riboszómákba való eljuttatásában.
A puromicin fehérje?
A puromicin egy antibiotikum fehérjeszintézis-gátló , amely a transzláció során idő előtti láncvégződést okoz.
Milyen antibiotikum a puromicin?
A puromicin egy aminonukleozid antibiotikum , amelyet a Streptomyces alboniger baktérium termel. Gátolja a fehérjeszintézist azáltal, hogy megzavarja a peptidtranszfert a riboszómákon, ami a transzláció során idő előtti láncvégződést okoz.
Milyen betegségek esetén alkalmazható a puromicin?
A puromicin egy antibiotikum, amely megakadályozza a bakteriális fehérjék transzlációját . Laboratóriumi sejttenyészetekben szelektív szerként használják. A puromicin mind a prokarióta, mind az eukarióta sejtekre toxikus, megfelelő dózisok mellett jelentős sejthalált eredményez.
A puromicin aminoglikozid?
A puromicin mind a prokarióta, mind az eukarióta sejtekre hat . Szerkezete hasonló a tirozin vagy fenilalanin aminoacil-tRNS hordozójának 3'-végéhez. ... A sztreptomicin egy aminoglikozid (triszacharid), amely megzavarja a transzláció beindulását a prokariótákban.
Puromicin használata a fehérjeszintézis mérésére
A puromicin tRNS?
Szerkezetileg a puromicin az aminoacilezett tRNS (aa-tRNS) 3'-végére hasonlít , és egy módosított adenozinbázis kovalensen kapcsolódik egy tirozin aminosavhoz [2].
A puromicin vízben oldódik?
A termék vízben (50 mg/ml) oldódik, így tiszta, színtelen vagy halványsárga oldatot kapunk. A törzsoldatot át lehet engedni egy 0,22 µm-es szűrőn, és aliquot részekben –20 °C-on tárolni. Metanolban (10 mg/ml) is oldódik.
Mennyi ideig tart a media puromicin?
Javaslatok: 1) Ha hozzá kell adnia a puromicint a médiához, hagyja a médiát szobahőmérsékleten, hogy felmelegedjen a 4 C-os tárolóhelyről a vízfürdő használata helyett. Ez körülbelül 3 hétig stabilan tartja.
Milyen gyors a puromicin kiválasztása?
A puromicin kiválasztásához legalább 48 óra szükséges. Az optimális hatást 3-10 napon belül kell elérni. A transzfektált sejteket vizsgáljuk.
Mibe hígítod a puromicint?
1 mg/ml-es puromicin törzsoldatot használva készítsen öt hígítást 2x végső koncentrációban, az 1. táblázat C és D oszlopában látható módon hígítva a törzsoldatot. (Ha a 2x antibiotikum-koncentrációt azonos térfogatú sejtszuszpenzióval hígítjuk, az 1. táblázat B oszlopában látható végső koncentrációt eredményezi.
Mennyi puromicint adjak hozzá?
A szokásos puromicin koncentráció a sejtvonaltól függően 1-4 ug/ml . A szelekciót (puromicin hozzáadása a sejttenyésztő tápközeghez) általában a transzfekció után 24 órával kezdik. A szelekciót a transzfektált sejtek állapotától függően 48 órával is elindíthatja.
A tetraciklinben van penicillin?
Írta: Drugs.com A tetraciklinek nem rokonok a penicillinekkel , ezért túlérzékeny betegeknél biztonságosan szedhetők. Egyéb nem rokon antibiotikumok közé tartoznak a kinolonok (pl. ciprofloxacin), makrolidok (pl. klaritromicin), aminoglikozidok (pl. gentamicin) és glikopeptidek (pl. vankomicin).
Hogyan készítsd a puromicin állományt?
Ez a termék 50 mg/ml vízben oldódik. A törzsoldatot 0,22 μm-es szűrővel történő szűréssel kell elkészíteni, majd aliquot részekben -20 °C-on tárolni. Ez a termék 10 mg/ml koncentrációban metanolban is oldódik.
Hogyan mérjük a fehérjeszintézist?
A fehérjeszintézis sebességét általában izotóp nyomjelzőkkel mérik, hogy számszerűsítsék egy jelölt aminosav beépülését az izomfehérjékbe.
A tRNS aminoacilezhető?
Az aminoacil-tRNS (más néven aa-tRNS vagy töltött tRNS) olyan tRNS, amelyhez rokon aminosav kémiailag kötődik (töltés). ... A genetikai kód degeneráltsága miatt több tRNS-nek ugyanaz az aminosavja, de eltérő antikodonjai lesznek. Ezeket a különböző tRNS-eket izoakceptoroknak nevezzük.
A puromicin fényérzékeny?
A puromicin-dihidroklorid fényérzékeny a legtöbb alapközeg, például a DMEM és az RPMI 1640 fényérzékenységével. Javasoljuk, hogy a termék fénynek való kitettségét a lehető legnagyobb mértékben korlátozza (pl.
Hogyan gátolja a cikloheximid a fehérjeszintézist?
A cikloheximid úgy fejti ki hatását , hogy megzavarja a fehérjeszintézis transzlokációs lépését (két tRNS-molekula és mRNS mozgása a riboszómához képest), így gátolja az eukarióta transzlációs megnyúlását.
Hogyan transzdukálsz egy sejtet?
- Olvassza fel a lentivírust jégen. Keverjen össze 8 µl Polybrene-t (1 mg/ml aliquot) 957 µl tenyészettel. ...
- Másnap cserélje ki a Lentivirus/Polybrene keveréket friss táptalajra. Inkubálja a sejteket standard sejttenyésztési körülmények között. ...
- koncentráció 0,1-10 μg/ml között mozog. Cserélje ki a táptalajt 48-72 óra múlva.
Hogyan kell a puromicint tárolni?
Tárolás és stabilitás: A Puromycint szobahőmérsékleten szállítják. Átvételkor 4°C vagy -20°C hőmérsékleten kell tárolni. A puromicin két évig stabil -20 °C-on, két évig 4 °C-on és 3 hónapig szobahőmérsékleten. Kerülje az ismételt fagyasztási-olvadási ciklusokat.
Mennyi ideig tart a Blasticidin szedése?
Az emlőssejtek jellemzően érzékenyek az 1-10 µg/ml közötti blaszticidin-koncentrációkra, a baktériumok pedig a 25-100 µg/ml-es koncentrációkra. A blaszticidin által kiváltott sejthalál gyorsan bekövetkezik, lehetővé téve a blaszticidin rezisztencia gént hordozó transzfektált sejtvonalak egy héten belüli szelekcióját.
Hogyan működik az mRNS megjelenítése?
Az mRNS-megjelenítés egy olyan megjelenítési technika, amelyet in vitro fehérjék és/vagy peptidek evolúciójára használnak olyan molekulák létrehozására, amelyek képesek kötődni a kívánt célponthoz . ... A jól kötődő mRNS-fehérje fúziók ezután reverz transzkripcióra kerülnek cDNS-vé, és szekvenciájukat polimeráz láncreakcióval amplifikálják.
Milyen betegségek esetén alkalmazható az Anisomycin?
Az anizomicint széles körben használták a fehérjeszintézis gátlójaként a tanulással és a memóriával, valamint a szinaptikus plaszticitással kapcsolatos vizsgálatokban . Működési módja azonban bonyolult. A transzláció gátlásán kívül ez a gyógyszer más hatásokat is mutat, leginkább a mitogén által aktivált protein kinázokon.
Az mRNS egy peptid?
A transzkripció során az RNS-polimeráz enzim (zöld) a DNS-t használja templátként egy pre-mRNS transzkriptum (rózsaszín) előállításához. A pre-mRNS-t úgy dolgozzák fel, hogy érett mRNS-molekulát képezzenek, amely lefordítható az eredeti gén által kódolt fehérjemolekula (polipeptid) felépítésére.