Hogyan lehet feloldani a liofilizált antitestet?
Pontszám: 4,9/5 ( 35 szavazat )A liofilizált antitesteket ionmentesített vagy desztillált víz hozzáadásával és a tartály szobahőmérsékleten 5-6 alkalommal történő megfordításával lehet helyreállítani. Az elkészített antitest több hétig tárolható 2-8°C-on, vagy 1-2 évig ≤ -20°C-on.
Hogyan lehet helyreállítani a liofilizált citokineket?
A liofilizált humán IL-2, prémium minőségű, ionmentes, steril szűrt vízzel 0,1-1,0 mg/ml végső koncentrációig javasolt, minimális 100 µl térfogatban. A további hígításokat 0,1%-os szarvasmarha szérum albuminnal kell elkészíteni. (BSA) vagy humán szérumalbumin (HSA) foszfáttal pufferolt sóoldatban."
Hogyan rehidratálják az antitesteket?
Az antitest PBS-ben történő feloldásához adjon hozzá a megfelelő adatlapon megadott mennyiségű ionmentesített vizet . Ha nagyobb térfogatot kívánunk, adjunk hozzá vizet a fent említett módon, majd a kívánt mennyiségű PBS-t és egy stabilizáló hordozófehérjét (pl. BSA) 2%-os végső koncentrációig.
Hogyan oldja fel a liofilizált enzimeket?
A liofilizált fehérje kezdeti feloldásához steril vagy RODI víz használatát javasoljuk. A részleteket lásd a termékek csomagolásában. Feloldódás után hígítsa fel az enzimet az alkalmazásához megfelelő térfogatra.
Liofilizálhatók az enzimek?
Az antitestek vagy enzimek liofilizálásának gyakori kihívása akkor fordul elő, ha a helyreállított fehérje nem teljesít ugyanazon a liofilizálás előtti aktivitási szinten. Ezt számos tényező okozhatja, beleértve a fagyasztás során fellépő károsodást, a segédanyagok interferenciáját és a pH-különbségeket.
Hogyan oldja fel a liofilizált primereket?
A primerek tipikus 100 mikromoláris (100X) törzskoncentrációjának elkészítéséhez oldja fel a primereket steril desztillált vízben, amely 10-szerese a csőben lévő nmolok mennyiségének , mikroliter vízzel. Ez az érték a cső oldalára van nyomtatva.
Az antitestek stabilak vízben?
Az antitestek általában stabil fehérjék , így ez nem okozhat nagy kárt. Az ismételt fagyasztási-olvasztási ciklusokat azonban kerülni kell. ... Ami azonban a tiszta (vagy nem túl tiszta) vízben oldott antitesteket illeti, tapasztalataim szerint a vízben lévő antitestek nem kötődnek megfelelően az antigénhez.
Hogyan állítja elő a másodlagos antitesteket?
A feloldáshoz javasoljuk , hogy steril, desztillált vizet adjon hozzá 1 mg/ml végső antitestkoncentráció eléréséhez (pl. 50 ug-os minták esetén adjon hozzá 50 uL dH2O-t; 100 ug-os mintákhoz adjon hozzá 100 uL dH2O-t).
Hogyan hígítod a citokineket?
Módszer: Hígítsa fel az újraszuszpendált citokineket vagy fehérjéket hordozófehérjét (például 0,1% BSA-t, 10% FBS-t vagy 5% HAS-t) tartalmazó oldattal, majd vegye ki alikvotból és tárolja -20 °C-on vagy -80 °C-on, hagyományos hűtőszekrény-fagyasztóban vagy ultrahűtőben. - alacsony hőmérsékletű hűtőszekrény.
Hogyan állítod helyre a fehérjéket?
A legtöbb fehérje visszaállítható steril desztillált víz hozzáadásával . 100 μg fehérjéhez a hozzáadandó víz mennyiségének 100 µL és 1 ml között kell lennie, így 1 mg/mL és 0,1 mg/ml közötti koncentrációjú fehérjeoldatot kapunk.
Mi az a liofilizált por?
A liofilizált por fagyasztva szárított por . Ez egy peptid liofilizált por formájában, azaz liofilizált por formájában. A liofilizált por fagyasztva szárítással előállított por.
Hogyan lehet helyreállítani a kalibrátort?
A feloldás során meghatározott mennyiségű desztillált vizet adnak a liofilizált minőségellenőrző anyaghoz . A víznek teljesen fel kell oldania a liofilizált tartalmat, így folyékony oldatot kap, amely kész elemzésre. A feloldás egyszerű folyamat, de nagyfokú precizitást igényel.
Miért van szükségünk másodlagos antitestekre?
A másodlagos antitestek jeldetektálást és amplifikációt biztosítanak, valamint kiterjesztik az antitestek használhatóságát a fehérjékhez való konjugáció révén . ... A másodlagos antitestek segítenek növelni az érzékenységet és a jelerősítést, mivel több másodlagos antitest kötődik egy elsődleges antitesthez.
Használhatjuk újra a másodlagos antitesteket?
Végül nagyon kevés kutató használja fel újra a másodlagos antitesteket , mivel általában kevesebbet éget el belőlük egyenértékű térfogatonként. A másodlagos antitestek is olcsóbbak, és sokkal hígabb tartományban használatosak.
Hogyan működik a másodlagos antitest?
Mi az a másodlagos antitest? A másodlagos antitest kötődik az elsődleges antitesthez, de nem kötődik a mintában jelen lévő célponthoz . A másodlagos antitestek az elsődleges antitestek nehéz láncaihoz kötődnek, így nem zavarják az elsődleges antitest célponthoz való kötődését.
Mennyi azidot adsz az antitestekhez?
A mikrobiális szennyeződés megelőzése érdekében nátrium-azid hozzáadható egy antitest-készítményhez 0,02% (w/v) végső koncentrációig. Sok Abcam antitest már tartalmazza ezt a tartósítószert 0,02 és 0,05% közötti koncentrációban. Ezt az adatlapokon a „Tárolási puffer” részben jelezzük.
Hogyan stabilizálja az antitesteket?
A megnövelt stabilitás érdekében glicerint vagy etilénglikolt adhatunk hozzá 50%-os végső koncentrációig, majd az antitestet -20 °C-on tárolhatjuk. Ezt az antitestoldatot kis, például 25 ul-es munkaalikvotokban kell tárolni [6], így kevesebb fagyasztási-olvadási ciklusnak vetik alá, amely denaturálhatja az antitesteket.
Mennyi ideig maradnak meg az antitestek a szervezetben?
Az Immunity folyóiratban megjelent tanulmány szerint azok az emberek, akik a COVID-19 enyhe eseteiből is felépülnek, legalább 5-7 hónapig termelnek antitesteket, és sokkal tovább tartanak.
Rendben van az alapozók vortexelése?
Ne forgasd túl sokat . De 5-10-ig finoman vortexelheti a megfelelő keveredés érdekében. Nem törné össze az alapozókat.
Hogyan készíti elő a TE-puffert a primer hígítására?
- Készítsen 800 ml desztillált vizet egy megfelelő edénybe.
- Adjunk hozzá 15,759 g Tris-Cl-t (kívánt pH-érték) az oldathoz.
- Adjunk az oldathoz 2,92 g EDTA-t (pH 8).
Hogyan oldja fel a primereket a PCR-ben?
A primereket feloldhatja: (1) Autoklávozott milli-Q minőségű víz: Adjunk hozzá féregvizet (65 hőmérséklet) , és inkubáljuk 65 hőmérsékleten száraz/vízfürdőben ~10 percig, alkalmankénti vortex keveréssel. (2) 10 mM TE (pH-8) vortexeléssel és megfelelő keveréssel, tegye a csöveket éjszakára 4 hőmérsékletre, ez fokozza a primer oldódását.
Mi az a Lyoprotectants?
Lyoprotektáns. Olyan anyag, amelyet a hatóanyagok védelme érdekében adnak a készítményhez . Ne feledje, hogy a lioprotektánsok védenek a szárítási szakaszokban, míg a kriovédők védenek a fagyasztási szakaszokban. Tömegnövelő szerként lioprotektáns is használható.