Miért használnak májkivonatot az Ames-tesztben?
Pontszám: 4,8/5 ( 57 szavazat )A májhomogenizátum használata szimulálja a feltételezett mutagén metabolikus lebomlását egy emlős rendszerben , és pontosabban megjósolja az emberek által elfogyasztott anyagok mutagenitását.
Mit használnak az Ames tesztben?
Az Ames-teszt egy gyakran használt módszer, amely baktériumokat használ annak tesztelésére, hogy egy adott vegyi anyag okozhat-e mutációkat a vizsgált szervezet DNS-ében . Ez egy biológiai vizsgálat, amelyet hivatalosan a kémiai vegyületek mutagén potenciáljának felmérésére használnak.
Miért nevezik az Ames-tesztet gyakran reverziós vizsgálatnak?
A meglévő mutációkat helyettesítő új mutációk indukálása lehetővé teszi a génfunkciók helyreállítását . Az újonnan képződött mutáns sejtek hisztidin hiányában növekedhetnek, és telepeket képezhetnek, ezért ezt a tesztet „Reversion assay”-nek is nevezik (Ames, 1971).
Használnak auxotrófokat az Ames tesztben?
Az Ames teszt a Salmonella typhimurium baktérium specifikus törzseit használja a mutációk kimutatására. Az alkalmazott S. typhimurium törzsek auxotrófokként ismertek.
Mi az S9 az Ames tesztben?
Az S9-frakciót az Ames-teszttel együtt használták a kémiai vegyületek mutagén potenciáljának felmérésére . A vegyi anyagok néha metabolikus aktiválást igényelnek ahhoz, hogy mutagénné váljanak. ... Az S9-frakciót a jelölt gyógyszerek metabolikus stabilitásának értékelésére is használták.
G T-8, Mi az Ames-teszt vagy a bakteriális fordított mutációs teszt? Általános toxikológia, 8. modul
Hogyan történik az Ames teszt?
Az Ames-teszt egy bakteriális revertáns mutációs tesztet kombinál az emlősök metabolizmusának szimulációjával, hogy rendkívül érzékeny tesztet hozzon létre a környezetben lévő mutagén vegyi anyagokra. Patkánymáj homogenizátumot készítenek metabolikusan aktív kivonat (S9) előállítására.
Mi az emberi máj mikroszóma?
Az emberi máj mikroszómái a gyógyszer-metabolizáló enzimek széles skáláját tartalmazzák, és javasolt tesztrendszerek olyan vizsgálatokhoz, mint a metabolitok azonosítása (MetID), a metabolikus stabilitás, az enzimgátlás, a reakció fenotipizálása és más in vitro gyógyszermetabolizmus- és farmakokinetikai (DMPK) vizsgálatok.
Használják még az Ames tesztet?
A teszt tehát javítható az emberi máj S9-frakciójának használatával; használatának korábban korlátozott volt a rendelkezésre állása, de mára már kereskedelmi forgalomban is elérhető , és ezért megvalósíthatóbb lehet. Egy adaptált in vitro modellt készítettek eukarióta sejtek, például élesztő számára.
Melyek az auxotrófok?
Például egy inaktivált uracil szintézis útvonal gént tartalmazó élesztőmutáns egy uracil auxotróf (pl. ha az élesztő orotidin 5'-foszfát dekarboxiláz génje inaktiválva van, a kapott törzs egy uracil auxotróf).
Mi a jelentősége az Ames-tesztnek?
Az Ames-teszt az egyik leggyakoribb mutagénteszt. Számos vegyszer szűrését teszi lehetővé, gyorsan és olcsón . Azt a néhány vegyszert, amely az Ames-teszt szerint mutagénnek tűnik, ezután további állatokon tesztelik, hogy felmérjék, mennyire képesek rákot okozni.
Milyen mutációt mutat ki az Ames-teszt?
A „Bruce Ames” tudós által kidolgozott Ames-teszt a vegyi anyagok lehetséges rákkeltő hatásának felmérésére szolgál a Salmonella typhimurium baktériumtörzs felhasználásával. Ez a törzs mutáns a hisztidin aminosav bioszintézisében. Ennek eredményeként nem tudnak növekedni és kolóniákat alkotni hisztidint nem tartalmazó táptalajban.
A genotoxicitás azonos a mutagenitással?
A genetikai változást mutációnak, a változást okozó ágenst pedig mutagénnek nevezik. A genotoxicitás hasonló a mutagenitáshoz, azzal a különbséggel, hogy a genotoxikus hatások nem feltétlenül járnak együtt mutációkkal. Minden mutagén genotoxikus, azonban nem minden genotoxikus anyag mutagén.
Mik az Ames-teszt korlátai?
Az Ames-tesztet főként az a modellszervezet korlátozza, amelyet a kémiai vegyület mutagenitásának értékelésére használ . Az Ames-teszt mutáns baktériumtörzseket (pl. his-S. typhimurium vagy trp-E. coli) használ, amelyek prokarióta sejtek, ezért nem tökéletes modellek az eukarióta emlőssejtek számára.
Milyen mutációt használnak a mutációs ráta indikátoraként az Ames-tesztben?
Az Ames-teszt tesztszervezetként a Salmonella typhimurium egy hisztidin auxotróf törzsét használja, amely a szintéziséhez szükséges alapvető gén mutációja miatt nem képes saját hisztidint szintetizálni.
Ki találta ki az Ames tesztet?
Bruce Ames (született: 1928. december 16., New York, New York, USA), amerikai biokémikus és genetikus, aki kidolgozta a kémiai mutagénekre vonatkozó Ames-tesztet. Az 1970-es években bevezetett teszt a vegyi anyagok azon képességét mérte fel, hogy mutációkat indukálnak a Salmonella typhimurium baktériumban.
Mi az a TA1535?
Az Ames Tester TA1535 typhimurium törzset és az E. coli törzset több mint 40 éve használják mutagén vegyületek kimutatására vegyi anyagokban, gyógyszerekben, kozmetikumokban, biocidekben, vízben és más környezeti mintákban.
Mik azok a feltételes mutációk?
Olyan mutáció, amely bizonyos (megengedő) környezeti feltételek mellett a vad típusú fenotípussal , más (korlátozó) körülmények között mutáns fenotípussal rendelkezik.
Mi az a prototróf és auxotróf?
Az auxotrófok és a prototrófok alternatív fenotípusok . Az auxotrófok olyan szervezetek, amelyek nem képesek a növekedésükhöz szükséges bizonyos szerves vegyületet előállítani, míg a prototrófok olyan szervezetek, amelyek képesek szintetizálni a növekedésükhöz szükséges összes szerves vegyületet szervetlen vegyületekből.
Mit jelent az auxotróf?
: olyan specifikus növekedési anyagra van szükség, amely meghaladja a baktériumok szülői vagy vad típusú auxotróf mutánsai által a normál metabolizmushoz és szaporodáshoz szükséges minimumot .
Milyen típusú mutáció az antibiotikum rezisztencia?
Az adott antibiotikum-koncentrációnál fennálló specifikus antibiotikum-baktérium kölcsönhatástól függően az antibiotikum-rezisztencia egyes esetekben egyetlen génmutációból (független mutáció) alakulhat ki, míg más esetekben több gén mutációira (kooperatív mutációk) van szükség.
Az emberekben mutagén anyagok szükségszerűen rákkeltőek?
A genetikában a mutagén olyan fizikai vagy kémiai ágens, amely tartósan megváltoztatja a genetikai anyagot, általában a DNS-t egy szervezetben, és így a természetes háttérszint fölé emeli a mutációk gyakoriságát. Mivel sok mutáció rákot okozhat, ezért az ilyen mutagének rákkeltőek, bár nem feltétlenül mindegyik .
Milyen enzimek találhatók a máj mikroszómáiban?
A májmikroszómák, mint a hepatocita endoplazmatikus retikulum vezikulumai, membrán fázis I enzimeket tartalmaznak, nevezetesen CYP -eket, flavintartalmú monooxigenázokat (FMO), észterázokat, amidázokat és epoxid-hidrolázokat, valamint II. fázisú enzimeket, például UGT-ket.
Milyen alakúak a májsejtek?
A sejtek sokszög alakúak , és oldalaik érintkezhetnek szinuszoidokkal (szinuszos felület) vagy szomszédos hepatocitákkal (oldalsó felületek). A hepatociták oldalsó felületének egy része módosul, és epecsatornát képez.
Mi a glükuronidációs reakció?
A glükuronidáció egy konjugációs reakció, amelynek során az UDP-glükuronsav kofaktorból származó glükuronsav kovalensen kapcsolódik egy nukleofil funkciós csoportot tartalmazó szubsztráthoz. A keletkező metabolit, az úgynevezett glükuronid, általában az epével és a vizelettel ürül.
Pozitív kontrollként használják a Modified Ames mutagenitási tesztben?
Ismert mutagén aktivitású vegyületeket használunk pozitív kontrollként minden tesztelő törzs esetében: TA98 – 2-nitrofluorén (0,4 μg/ml); TA100 – 4-nitrokinolin-N-oxid (0,04 μg/ml); TA1535 – NaN3 (0,2 μg/ml); TA1537 – 9-aminoakridin (3 μg/ml); E.