Mi az immunfluoreszcens vizsgálat elve?

Az immunfluoreszcencia egy olyan vizsgálati eljárás, amelyet elsősorban biológiai mintákon használnak, és klasszikusan antigének kimutatására szolgáló eljárásként határozzák meg sejtes környezetben antitestek segítségével . Az antigénjük elleni antitestek specifitása az immunfluoreszcencia alapja.

Hogyan használjuk az immunfluoreszcenciát?

Immunfluoreszcenciás protokoll – szövetek A mintákat perfundáljuk vagy kivágjuk, és 4%-os paraformaldehid fixálóban rögzítjük. Tegye át a szövetet 20%-os szacharózba PBS -ben, hagyja egy éjszakán át 4 °C-on. Vigye át a szövetet 30%-os szacharózba PBS-ben, és hagyja 4 °C-on, hogy teljesen impregnáljon. Amikor a szövet lesüllyed, teljesen át van impregnálva.

Mi a közvetlen immunfluoreszcens technika?

Direkt immunfluoreszcens technika: egylépéses szövettani festési eljárás a szöveti antigénekhez kötődő in vivo antitestek azonosítására, egyetlen, fluoroforral jelölt antitest [5] felhasználásával a szövetek vagy sejtek festésére. Az antitest felismeri a célmolekulát és kötődik hozzá.

Hogyan figyeli meg az immunfluoreszcenciát?

Az elsődleges vagy közvetlen immunfluoreszcencia egyetlen antitestet használ, amely közvetlenül egy fluoreszcens festékhez van konjugálva. Az antitest felismeri a célmolekulát, kötődik hozzá, és a konjugált fluoreszcens festék mikroszkóppal kimutatható .

Mire használható az immuncitokémia?

Miután az antitestek a sejtmintában lévő antigénhez kötődnek, az enzim vagy festék aktiválódik, és az antigén mikroszkóp alatt látható. Az immuncitokémiát betegségek, például rák diagnosztizálására használják. Használható arra is, hogy különbséget tegyen a különböző ráktípusok között.

Mi a különbség a fluoreszcencia és az immunfluoreszcencia között?

Az immunfluoreszcencia azt jelzi, hogy fluoreszcens jelölést használtak a kérdéses marker megjelenítésére, de a fluoreszcens markerek használhatók immuncitokémiához (sejtek) vagy immunhisztokémiához (szövetek). ... Az immunfluoreszcenciát tenyésztett sejtvonalakon, szövetmetszeteken vagy egyedi sejteken lehet alkalmazni.

Melyik vírus képes kimutatni az immunfluoreszcenciát?

Az influenza A és influenza B vírusok kimutatása közvetett immunfluoreszcens technikával történik. Az egyes vírusokra specifikus monoklonális antitestek a fertőzött sejtek citoplazmájában expresszált antigénhez kötődnek.

Mi az immunprecipitációs technika?

Az immunprecipitáció (IP) egy fehérjeantigén oldatból történő kicsapásának technikája olyan antitest felhasználásával, amely specifikusan kötődik az adott fehérjéhez . Ez az eljárás felhasználható egy adott fehérje izolálására és koncentrálására sok ezer különböző fehérjét tartalmazó mintából.

Mi a különbség a direkt és a közvetett immunfluoreszcencia között?

A közvetlen immunfluoreszcencia fluoroforhoz konjugált antitestet használ a célfehérje megfestésére. Az indirekt immunfluoreszcencia során először az elsődleges antitestet kötik a célponthoz, majd az elsődleges antitestet egy konjugált másodlagos antitest segítségével detektálják.

Melyek az immunfluoreszcens vizsgálat hátrányai?

A szövetek immunfluoreszcens vizsgálatának fő hátránya, hogy a fagyasztott metszetek morfológiája rossz, ami megnehezíti a léziók megjelenítését . Ezenkívül a szöveteken végzett fluoreszcens vizsgálatok leolvasása technikailag is kihívást jelenthet.

Hogyan végezzük el az indirekt immunfluoreszcens vizsgálatot?

A közvetett immunfluoreszcencia teszt A lemezeket megmossuk, hogy eltávolítsuk a meg nem kötött primer antitesteket. A lemezeket további 30 percig inkubáljuk fluoreszcens festéket tartalmazó másodlagos antitestekkel. Mindegyik tárgylemez fedőlemez alá van szerelve. Minden tárgylemezt fluoreszcens mikroszkóppal vizsgálunk.

Hogyan adjunk hozzá antitesteket?

Hogyan szereljük fel az immunfluoreszcenciát?

Tegyen egy csepp szerelési közeget a fedőlemez közepére (ne a tárgylemezre!). Ha hosszú fedőlemezt használ, akkor csepp helyett egy sor rögzítőanyagot is használhat. Tegye fejjel lefelé a tárgylemezt, és húzza le a fedőlemezre, amíg meg nem érinti a rögzítőközeg cseppjét, és fel nem tapad a fedőlemezre.

Mit tesz a blokkolás az immunfluoreszcenciában?

Mi a blokkolás az immunhisztokémiában? A blokkolás elengedhetetlen az antitestek vagy más reagensek szövethez való nem specifikus kötődésének megakadályozásához . ... A nem specifikus kötődés mérséklése érdekében egy blokkoló lépést kell végrehajtani az elsődleges antitesttel való inkubálás előtt.

Miért alkalmazzák az immunprecipitációt?

Az immunprecipitációt (IP) használják a specifikus antitesthez kötődő fehérjék elkülönítésére a minta többi részétől , míg a co-IP segítségével azonosítják a fehérje-fehérje kölcsönhatásokat az IP-hez használt antitesthez kötődő fehérje és a további fehérjék között, amelyek immunoblottal mutatják ki.

Hogyan végezzük a koimmunprecipitációt?

Mi a különbség az immunprecipitáció és a koimmunprecipitáció között?

Az immunprecipitációban (IP) egy antitestet használnak a specifikus célpont vagy antigén keverékből történő tisztítására . A koimmunoprecipitációban (Co-IP) egy antitestet használnak a célantigén és a kötőpartnerek megtisztítására egy vegyes mintából.

Melyik a három legjobb vírusfelderítési módszer?

Vírusfelderítési módszerek Ma már négy fő vírusészlelési módszert használnak: szkennelést, integritás-ellenőrzést, elfogást és heurisztikus észlelést . Ezek közül a szkennelés és az elfogás nagyon gyakori, a másik kettő csak a kevésbé széles körben használt vírusirtó csomagokban.

Mi a leggyakoribb vírusazonosítási módszer?

A PCR az egyik legszélesebb körben alkalmazott laboratóriumi módszer a vírusos nukleinsavak kimutatására.

Mi a különbség az Elisa és az immunfluoreszcencia között?

Az egykor aranystandardnak tartott immunfluoreszcens technikát (IF) az ELISA egyre inkább kiszorítja . Az ELISA teljesen automatizálható, és az értelmezés nem igényli az IF-ben szükséges széleskörű tapasztalatot.