In vitro citotoxicitási vizsgálat?
Pontszám: 4,8/5 ( 10 szavazat )A tenyésztett sejtekkel végzett in vitro sejtéletképességi és citotoxicitási vizsgálatokat széles körben használják vegyi anyagok citotoxicitási vizsgálatára és gyógyszerszűrésre . ... Jelenleg ezeket a vizsgálatokat az onkológiai kutatásokban is használják a vegyület toxicitásának és a tumorsejtek növekedésének gátlásának értékelésére a gyógyszerfejlesztés során.
Mi az a citotoxikus vizsgálat?
A citotoxicitási vizsgálatok bizonyos sejtes vagy intercelluláris szerkezetek és/vagy funkciók elvesztését mérik, beleértve a halálos citotoxicitást is . Így utalnak arra, hogy sejt- és szövetsérülést okozhatnak, és mint ilyenek, egyes kutatók szövetsérülések, köztük szemsérülések előrejelzésére használták őket.
Hogyan működik a citotoxicitási vizsgálat?
A sejteket gyakran használják a tenyészetben egy általánosan használt citotoxicitási vizsgálathoz, ahol a sejteket egy vizsgált vegyület hatásának teszik ki, és bizonyos inkubációs időszak után egy markert mérnek, amely tükrözi a jelenlévő életképes sejtek számát a pozitív (toxin) és negatív (toxin) sejtekhez viszonyítva. vivőanyag) kontroll kezelések.
Hogyan mérjük a citotoxicitást?
A sejtek citotoxicitásának mérése Bár számos különböző módon mérhető, a sejtek életképességének felmérése létfontosságú festékek (formazan festékek) , proteáz biomarkerek vagy ATP-tartalom mérése révén a citotoxicitás meghatározásának egyik leggyakrabban használt módszere.
Mi a célja a citotoxicitási vizsgálatnak, a sejt életképességi vizsgálatának?
A sejtek életképességi tesztjei általában a sejtek egészségi állapotát mutatják be a metabolikus aktivitás, az ATP-tartalom vagy a sejtproliferáció mérésén keresztül . A sejtek életképességét sejttoxicitási vizsgálatokkal is fel lehet mérni, amelyek a sejthalál markereire, például a membrán integritásának elvesztésére utalnak.
Citotoxicitási vizsgálatok (1) In vitro vizsgálat és sejttenyésztés
Mi az MTT assay elve?
Az MTT vizsgálat egy kolorimetriás vizsgálat a sejt metabolikus aktivitásának mérésére. A nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfát (NADPH)-függő celluláris oxidoreduktáz enzimek azon képességén alapul, hogy az MTT tetrazólium festéket oldhatatlan formazánná redukálják , amely lila színű (10.1. ábra).
Mi az apoptózis vizsgálat?
Az apoptózis-vizsgálat kimutatja és számszerűsíti a programozott sejthalálhoz kapcsolódó sejtes eseményeket , beleértve a kaszpázaktivációt, a foszfatidil-szerin (PS) sejtfelszíni expozícióját és a DNS-fragmentációt.
Mi a citotoxicitási aktivitás?
A citotoxicitás a sejtre mérgező tulajdonság . A mérgező anyagok példái a kémiai anyagok. A sejtek citotoxikus vegyülettel való kezelése különféle sejtsorsokat eredményezhet. A sejtek nekrózison eshetnek át, melynek során elveszítik a membrán integritását és gyorsan elpusztulnak a sejtlízis következtében.
Mi az a sejt citotoxicitási teszt?
Absztrakt. A citotoxicitási teszt egyike azoknak a biológiai értékelő és szűrővizsgálatoknak, amelyek szövetsejteket használnak in vitro az orvosi eszközök sejtnövekedésének, szaporodásának és morfológiai hatásainak megfigyelésére .
Mi az a citotoxicitási teszt?
A citotoxicitási tesztek szűrővizsgálatoknak minősülnek, amelyeket az élő sejt implantátumra adott reakciójának értékelésére használnak sejttenyésztési vizsgálatban, beleértve a sejtek életképességét és sejtnövekedési képességét.
Mi a különbség a sejt életképessége és a citotoxicitás között?
A RealTime-Glo™ MT Cell Viability Assay egy nem litikus vizsgálat, amely folyamatosan figyeli a sejtek életképességét az idő múlásával a sejt redukáló potenciálja alapján. A citotoxicitási vizsgálatok a sejthalál esetén a membrán integritásának elvesztésével kapcsolatos paramétereket mérik .
Mi a különbség a citotoxicitás és a toxicitás között?
Míg a toxicitás egy általánosabb kifejezés arra, hogy egy anyag mennyire káros egy szervezetre; A citotoxicitás azt a kifejezést jelenti, hogy egy anyag mennyire mérgező a sejtekre. Egy citotoxikus vegyület sejtkárosodást vagy -elhalást okozhat , akár nekrózis, akár apoptózis révén.
Mi okozza a citotoxicitást?
A vegyi anyagok úgy hatnak, hogy gátolják a fehérje- vagy nukleinsavszintézist a sejtben, gyengíthetik a sejt membránját vagy akadályozhatják a sejt energiatermelési útvonalait. A citotoxicitást okozó citotoxikus szerek gyakori példái a vírusokat, baktériumokat és rákos sejteket elpusztító T-sejtek .
Mit értesz teszt alatt?
A vizsgálat egy anyag elemzésének folyamata annak összetételének vagy minőségének meghatározására . A kifejezést gyakran használják a bányászatban az ércek vagy ásványok vizsgálatára. Az assay kifejezést a környezetvédelmi, vegyipari és gyógyszeriparban is használják.
Mi az a sejtproliferációs vizsgálat?
A sejtproliferációs vizsgálatok jellemzően az osztódásban lévő sejtek számában vagy a sejtpopulációban bekövetkező változásokat mutatják ki . A sejtproliferációs vizsgálatok alapvetően négy módszerre oszlanak: metabolikus aktivitási vizsgálatok, sejtproliferációs marker vizsgálatok, ATP koncentrációs vizsgálatok és DNS szintézis vizsgálatok.
Mi a közvetlen citotoxicitás?
A közvetlen citotoxicitás azt a károsodást vizsgálja, amelyet a tárgy jelenlétében szaporodó sejteknek ugyanabban a folyékony közegben, akadálymentesen helyeztek el . Létezik még az extraktum teszt, amelyben a tárgyból extrahálható anyagot adnak a sejttenyésztő tápközeghez.
Mi a citotoxicitási hatás?
A "citotoxikus" kifejezés legtöbbször a kemoterápiás gyógyszer rákos sejtekre gyakorolt hatására utal. Ebben az értelemben a citotoxikus szer megkülönböztethető a citosztatikustól. Ezzel szemben a citosztatikus gyógyszer gátolná a sejtosztódást és -növekedést, de nem eredményezne közvetlenül sejthalált. 3
Mik azok a természetes gyilkos sejtek?
Az immunsejt olyan típusa, amely szemcséket (kis részecskéket) tartalmaz olyan enzimekkel, amelyek képesek elpusztítani a daganatsejteket vagy a vírussal fertőzött sejteket. A természetes gyilkos sejt a fehérvérsejtek egy fajtája . NK sejtnek és NK-LGL-nek is nevezik.
Melyik gyógyszernek van citotoxikus hatása?
Számos citotoxikus rákellenes gyógyszer, köztük a paklitaxel (Luo és Prestwich, 1999; Luo et al., 2000; Auzenne és mtsai, 2007), a doxorubicin (Luo és mtsai, 2002), a nátrium-butirát (Coradini és mtsai, 1999; 2004a,b), a mitomicin c (Akima és mtsai, 1996) és az epirubicin (Akima és mtsai, 1996) növelte a CD44-specifikus...
Hogyan igazolja az apoptózist?
Az apoptózist a foszfatidil-szerin plazmamembránon történő külsődésének mérésével mutatják ki, fluoreszcens jelöléssel ellátott annexin V segítségével . Ezenkívül áramlási citometria is használható a sejtméret változásainak meghatározására (Bortner és Cidlowski, 2001; Warnes és mtsai. 2011).
Mi a legjobb apoptózis vizsgálat?
A Western-blot (mint például a PARP vagy a kaszpáz 3 hasítása), a DNS-fragmentációs vizsgálat és a FACS szintén ajánlott, hogy megtudjuk, mit is észlel valójában. Valós idejű PCR-t is használhat az érdeklődésre számot tartó génjeihez, hogy megtalálja az apoptózis további útját az anti/pro apoptotikus gének mellett.
Hogyan észlelhető az apoptózis?
A sejtkromatin állapotának meghatározására alkalmas általános módszer a DNS-létra-vizsgálat. A kromatin törései DNS-fragmensek képződését eredményezik, amelyek többféle módszerrel is kimutathatók. Gélelektroforézissel kimutatva a fragmentált DNS létraképződése felhasználható az apoptózis jellemzésére.
Hogyan történik az MTT assay kiszámítása?
- Dobja ki a táptalajt a sejttenyészetekből. ...
- Adjon 50 µL szérummentes táptalajt és 50 µL MTT oldatot minden lyukba.
- Inkubálja a lemezt 37 °C-on 3 órán át.
- Inkubálás után adjon 150 µl MTT oldószert minden lyukba.
- Csomagolja be a tányért fóliába, és rázza rá egy orbitális rázógépen 15 percig. ...
- Olvassa le az abszorbanciát OD=590 nm-en.
Miért használnak DMSO-t az MTT vizsgálatban?
A reakció végén DMSO-t adunk hozzá, hogy feloldja a reakció során képződött formazánkristályokat . ... A DMSO-t csak MTT festékkel való inkubálás után adjuk hozzá, miután eltávolította a táptalajt a sejtekből, hogy feloldja a formazán kristályokat.
Mi az IC50 az MTT vizsgálatban?
MTT vizsgálat: A sejtpusztulást az MTT tetrazóliumvegyületen alapuló rendszerrel értékeltük. ... Az 50%-os sejtnövekedésgátlást okozó vegyületkoncentrációkat (IC50) a sejttúlélést (%) a gyógyszerkoncentráció (µM) függvényében ábrázoló görbékből számítottuk ki.