Hogyan lehet csökkenteni az autofluoreszcenciát?

Pontszám: 4,2/5 ( 75 szavazat )

Használjon fluoroforokat, amelyek a mintában lévő autofluoreszcens vegyületektől távolabbi hullámhosszon bocsátanak ki . Általában a távoli vörös hullámhosszú fluoroforok, például a CoralLite 647 a legjobbak erre. A kereskedelemben kapható reagensek, mint például a TrueVIEW (VectorLabs), több okból is csökkentik az autofluoreszcenciát.

Mi okozza az autofluoreszcenciát?

Az autofluoreszcencia a fluoreszcens fény kibocsátása a szem struktúráiból nátrium-fluoreszcein hiányában. Az autofluoreszcenciát okozó állapotok a látóidegfej drusen és az asztrocita hamartoma . Pszeudofluoreszcencia akkor lép fel, amikor a kék gerjesztő és a zöld gátszűrő átfedi egymást.

Hogyan csökkenthető a háttér fluoreszcenciája?

Mit tehet a háttér fluoreszcenciájának csökkentése érdekében?
  1. Próbáljon meg címkézni egy másik szűrőhöz illő festékkel. ...
  2. Mérje meg a fluoreszcencia intenzitását egy olyan lyukból, amely csak a sejtjeit és a gyógyszert vagy kezelést tartalmazza. ...
  3. Ellenőrizze a médiát. ...
  4. Ellenőrizze a hajóját.

Hogyan lehet kioltani a vér autofluoreszcenciáját?

Az egyik legszélesebb körben használt módszer az autofluoreszcencia kioltására a szövetek kezelése Sudan Black B festékkel . A Sudan Black B egy lipidben oldódó festék, amely a lipofuscin granulátumokhoz kötődik, hogy csökkentse azok fluoreszcenciáját.

Mi az autofluoreszcencia a mikroszkópban?

Az autofluoreszcencia a biológiai struktúrák, például a mitokondriumok és a lizoszómák természetes fénykibocsátása, amikor elnyelték a fényt , és a mesterségesen hozzáadott fluoreszcens markerektől (fluoroforok) származó fény megkülönböztetésére szolgál.

Breathe & Learn #4: Hogyan lehet csökkenteni a nem kívánt autofluoreszcenciát

35 kapcsolódó kérdés található

Hogyan lehet felismerni az autofluoreszcenciát?

A legtöbb autofluoreszcenciát rövidebb fényhullámhosszon észlelik, a legtöbb abszorbeálódás 350-500 nm-en, és a kibocsátás 350-550 nm-en történik. Ez különösen igaz az emlőssejtekre, amelyek sok olyan vegyületet tartalmaznak, amelyek a 488 nm-es lézerrel gerjesztenek és a FITC tartományban bocsátanak ki.

Fluoreszkáló a bőr?

A bőr és az epidermális függelékek jellegzetes fluoreszcenciát kölcsönöznek, akárcsak a fejbőr gombás fertőzései, bár a különböző gombák tenyészetei fluoreszcens tulajdonságaikban eltérőek. A bőr ultraibolya sugárzás alatti mikroszkópos vizsgálatát (fluoreszcens mikroszkópia) csak ritkán alkalmazták.

Fluoreszkál a hemoglobin?

Felfedeztük, hogy a hemoglobin nagy energiájú Soret fluoreszcenciát bocsát ki , amikor kétfoton gerjeszti a látható femtoszekundumos fényforrás. A hemoglobin fluoreszcencia egyedi spektrális és időbeli jellemzőit időfelbontású spektroszkópiai detektáló rendszerrel mértük.

Hogyan lehet megszabadulni a fluoreszcenciától?

Ebben az esetben a fluoreszcencia könnyen eltávolítható pufferolt sóoldattal történő alapos öblítéssel vagy oldószerek gondos használatával . Ha sejteket rögzít, a rögzítési módszer nagy hatással lehet az autofluoreszcenciára.

Hogyan távolíthatom el a fluoreszcenciát?

Mit tehet a háttér fluoreszcenciájának csökkentése érdekében?
  1. Próbáljon meg címkézni egy másik szűrőhöz illő festékkel. ...
  2. Mérje meg a fluoreszcencia intenzitását egy olyan lyukból, amely csak a sejtjeit és a gyógyszert vagy kezelést tartalmazza. ...
  3. Ellenőrizze a médiát. ...
  4. Ellenőrizze a hajóját.

Milyen fényt használ a fluoreszcens mikroszkóp?

A biológiában manapság használt fluoreszcens mikroszkópok többsége epifluoreszcens mikroszkóp, ami azt jelenti, hogy mind a gerjesztés, mind a fluoreszcencia megfigyelése a minta felett történik. A legtöbben Xenon vagy Mercury ívkisülési lámpát használnak az intenzívebb fényforráshoz.

Hogyan javíthatom ki az autofluoreszcenciát?

Használjon fluoroforokat, amelyek a mintában lévő autofluoreszcens vegyületektől távolabbi hullámhosszon bocsátanak ki . Általában a távoli vörös hullámhosszú fluoroforok, például a CoralLite 647 a legjobbak erre. A kereskedelemben kapható reagensek, mint például a TrueVIEW (VectorLabs), több okból is csökkentik az autofluoreszcenciát.

Hogyan lehet abbahagyni a fényfehérítést?

A fényfehérítés minimalizálásának legjobb módja a fluorofor által kitett fény mennyiségének minimalizálása. Ezt három fő módon lehet megtenni:
  1. A fényintenzitás csökkentésével. ...
  2. A fényexpozíció idejének csökkentésével. ...
  3. Fényfehérítés elleni rögzítőanyag hozzáadásával.

Az elhalt sejtek autofluoreszcensek?

Az elhalt sejtek nem specifikusan kötődnek sok reagenssel, jelentősen növelik az autofluoreszcenciát, és megváltoztatják a szórási tulajdonságokat. Az extracelluláris mátrix törmelék jelenléte szintén hozzájárul az autofluoreszcenciához a kollagén és az elasztin révén. Az elhalt sejtek és törmelék eltávolítása egyszerű eljárás.

Melyik két minta szolgálhat kontrollként a háttér autofluoreszcenciájához. Mik az autofluoreszcencia lehetséges forrásai az egyes mintákban?

A háttér autofluoreszcenciájának két kontrollmintája a V minta és a vízminta . A V törzsben az autofluoreszcencia néhány lehetséges forrása lehet az egyes sejtekben található tokondriumok, amelyek gerjesztéskor a sejtek fluoreszkálását okozzák.

Hogyan tud fluoreszcenciát kiváltani egy kémiai fixáló?

Az aldehid fixálók által kiváltott fixáló fluoreszcencia túlnyomórészt a zöld/sárga spektrum tartományban van. Alapvetően a fixáló térhálósodása és reakciója által okozott szerkezetváltozásnak köszönhető . A sok kémiai kötést tartalmazó dolgok, mint például a C=C, szintén sok autofluoreszcenciát eredményeznek.

A fluoreszkáló világítás káros a bőrére?

A Stony Brook Egyetem egyik tanulmányában különösen a fluoreszkáló izzóknál nagyobb arányban fordulnak elő olyan hibák , amelyek olyan UV-sugárzás kibocsátásához vezetnek, amelyek égethetik a bőrt és sejthalált idézhetnek elő, ami a bőr idő előtti öregedéséhez és ráncosodásához vezet.

Érdemes bekapcsolva hagyni a fénycsövet?

"A fénycsövek öt másodpercnél hosszabb ideig tartó kikapcsolása több energiát takarít meg, mint amennyit a visszakapcsolásuk elfogy" - magyarázza a DOE. ... Ezen megfontolások fényében a DOE egy egyszerű ökölszabályt javasol: Hagyja bekapcsolva a fénycsövet, ha 15 percig vagy kevesebb ideig nem tartózkodik a helyiségből .

A fluoreszkáló fény befolyásolja a bőrt?

A fénycsövek, beleértve a kompakt fénycsöveket is, UV-sugárzást bocsátanak ki, amely káros lehet a különösen érzékeny betegek egy részére [C evidenciaszint]. A CFL káros lehet a bőr közvetlen közelében (körülbelül 20 cm-re vagy kevesebbre) [B bizonyíték szint].

Miért használunk áramlási citometriát?

Az áramlási citometria jól bevált módszert biztosít az oldatban lévő sejtek azonosítására, és leggyakrabban perifériás vér, csontvelő és egyéb testnedvek értékelésére használják. Az áramlási citometriás vizsgálatokat az immunsejtek azonosítására és mennyiségi meghatározására, valamint a hematológiai rosszindulatú daganatok jellemzésére használják.

Mi az a FACS elemzés?

A fluoreszcenciával aktivált sejtválogatás (FACS) egy olyan technika, amely meghatározott sejtpopulációkat tisztít meg az áramlási citometriával kimutatott fenotípusok alapján . Ez a módszer lehetővé teszi a kutatóknak, hogy jobban megértsék egyetlen sejtpopuláció jellemzőit más sejtek befolyása nélkül.

Minden sejt autofluoreszkál?

Minden prokarióta és eukarióta sejt belső természetes fluoreszcenciát (autofluoreszcenciát; AF) mutat a különböző fluoreszcens sejtszerkezeti komponensek és metabolitok jelenléte miatt, mint például a flavinok, nikotinamid-adenin-dinukleotid (NAD), aromás aminosavak, lipofuscinek, fejlettebb glikémiás végtermékek ,...

A fényfehérítés tartós?

Az optikában a fényfehérítés (amelyet néha fadingnak is neveznek) egy festék vagy egy fluorofor molekula fotokémiai megváltoztatása, amelynek következtében az tartósan nem tud fluoreszkálni . ... A kovalens kötések ilyen irreverzibilis módosulását a fluoroforok szingulett állapotából triplett állapotba való átmenet okozza.

A DAPI csinál fotófehérítést?

A DAPI-DNS komplex gerjesztési és emissziós hullámhossza 360 nm, illetve 460 nm. A legtöbb fluoreszkáló festék elhalványul (fotofehérítő), ha gerjesztő fénynek teszik ki.