Hogyan működik a resazurin?
Pontszám: 4,4/5 ( 44 szavazat )A rezazurint oxidációs-redukciós (REDOX) indikátorként használják, amely kolorimetriás változáson megy keresztül a sejtmetabolikus redukció hatására . A redukált forma, a resorufin rózsaszín és erősen fluoreszkáló, és a termelődő fluoreszcencia intenzitása arányos a lélegeztető élő sejtek számával.
Hogyan működik a resazurin teszt?
A resazurin vizsgálati protokoll az oxidált, nem fluoreszcens kék resazurin redukálásán alapul, a mitokondriális légzőlánc élő sejtekben vörös fluoreszcens festékké (rezorufinné) . A termelődő rezorufin mennyisége egyenesen arányos az élő sejtek számával.
Mi váltja ki a resazurint a Resorufinhoz?
A resazurin hatékonyan redukálódik a mitokondriumokban, így hasznos a mitokondriális metabolikus aktivitás értékelésére is. Általában NADPH- dehidrogenáz vagy NADH-dehidrogenáz mint enzim jelenlétében a NADPH vagy a NADH az a redukálószer, amely a rezazurint rezorufinné alakítja.
A resazurin autoklávozható?
A resazurin, egy oldható festék, amely a sejtpopuláció metabolikus aktivitásával arányosan erősen fluoreszkáló rezorufinné redukálódik, értékes, nem invazív eszköz a sejtszám mérésére.
Mi a resazurin funkciója?
A rezazurin (7-hidroxi-10-oxidofenoxazin-10-ium-3-on, nátrium) egy kék fluorogén festék, amelyet redox indikátorként használnak baktériumok, élesztőgombák vagy emlőssejtek sejtek életképességének és proliferációjának vizsgálataiban .
Resazurin teszt – tejelemzés
Milyen enzim csökkenti a rezazurint?
Úgy gondolják, hogy a resazurin redukciója a mitokondriumokból és a citoszolból származó reduktáz vagy diaforáz típusú enzimek révén valósul meg [31].
Mit mér a resazurin teszt?
A Resazurin tesztet a nyerstej minőségének értékelésére tervezték. ... A resazurin a tejnek jellegzetes kék színt ad, és a teszt a tejben lévő baktériumok azon képességén alapul, hogy csökkentik a kék színezéket.
Milyen színű a resazurin, ha csökkentik?
3.1. Az aktív bakteriális anyagcsere visszafordíthatatlanul redukálja a resazurint egy rózsaszín , fluoreszkáló termékké, amelyet rezorufinnak neveznek. Ennek eredményeként a kékről rózsaszínre történő színváltozás az életképes sejtek jelenlétét jelzi.
A resazurin mérgező a sejtekre?
Az alamarBlue(®) márkanéven a sejt életképességi indikátoraként bevezetett rezazurint általában nem mérgezőnek tekintik, ha a gyártó által javasolt rövidebb inkubációs időre vonatkozó előírásoknak megfelelően használják. Problémák merülnek fel azonban, ha az expozíciós időt kiterjesztik a hosszabb távú tenyészetekre, napok nagyságrendjében.
Hogyan sterilizálják a resazurint?
- Oldjuk fel az alamárkéket PBS-ben (pH 7,4) 0,15 mg/ml-re.
- Szűrje le és sterilizálja a resazurin oldatot egy 0,2 μm-es szűrőn keresztül egy steril, fénytől védett edénybe.
- A resazurin oldatot fénytől védve, gyakori használat esetén 4°C-on, hosszú távú tárolás esetén -20°C-on tárolja.
Hogyan készítsünk resazurin festéket?
Készítse elő a Resazurin törzsoldatot (100x) úgy, hogy 0,50 g Resazurin-nátriumsót 100 ml 1x PBS- ben old. Készítsen munkaoldatot a Resazurinhoz az elkészített törzsoldat 1:100 arányú hígításával 1x PBS használatával.
A resazurin fényérzékeny?
A CellTiter-Blue® reagensben lévő resazurin festék (kék) és a resorufin termék (rózsaszín) fényérzékeny . A CellTiter-Blue® reagens hosszabb ideig tartó fényhatása megnövekedett háttérfluoreszcenciát eredményez a vizsgálatban, és csökkenti az érzékenységet.
Mi az a Resorufin?
: a fenoxazin osztályba tartozó C 12 H 7 NO 3 vörösbarna kristályos színezék , amely fluoreszcens vörös vagy rózsaszín oldatokat ad, amely nitrozil-kénsav rezorcinon vagy a resazurin redukciójával képződik, és redukcióval színtelen dihidrot eredményez. derivált.
Hogyan teszteli a sejtek életképességét?
A sejtek életképességi tesztjei általában a sejtek egészségi állapotának leolvasását biztosítják a metabolikus aktivitás, az ATP-tartalom vagy a sejtproliferáció mérésén keresztül. A sejtek életképességét sejttoxicitási vizsgálatokkal is fel lehet mérni, amelyek a sejthalál markereire, például a membrán integritásának elvesztésére utalnak.
Mi az a resazurin redukciós vizsgálat?
Az alamarBlue vagy CellTiter-Blue assay néven ismert resazurin-redukciós (RR) vizsgálatot gyakran használják eukarióta sejtekben a sejt életképességének/proliferációs kapacitásának meghatározására . Nem értékelték, hogy ez a vizsgálat alkalmazható-e a többsejtű szferoidok életképességének értékelésére.
Mi az MTT assay elve?
Az MTT vizsgálat egy kolorimetriás vizsgálat a sejt metabolikus aktivitásának mérésére. A nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfát (NADPH)-függő celluláris oxidoreduktáz enzimek azon képességén alapul, hogy az MTT tetrazólium festéket oldhatatlan formazánná redukálják , amely lila színű (10.1. ábra).
Az Alamar Blue mérgező?
A resazurin, az alamarBlue reagens hatóanyaga egy nem mérgező , sejtáteresztő vegyület, amely kék színű és gyakorlatilag nem fluoreszkál. Az élő sejtekbe jutva a resazurin rezorufinné redukálódik, egy vörös színű és erősen fluoreszkáló vegyületté.
Hol található a húsleves oszlopban a resazurin festék?
Hol található a resazurin a húsleves oszlopban? A húsleves legtetején sávot alkotva .
Milyen színű a resazurin indikátor oxigénmentes környezetben?
A rezazurin kéktől liláig terjed (pH > 6,5).
Mi a resazurin szerepe a folyékony tioglikolát közegben?
Az indikátorral ellátott folyékony tioglikolát tápközegben a resazurin egy oxidációs-redukciós indikátor , oxidálva rózsaszínű (mivel az oxigén felszívódik a közegbe), redukálva pedig színtelen.
Hogyan teszteli a Resazurint?
- Fejje meg alaposan a mintát, egyik edényből a másikba fordítva.
- Öntsünk 10 ml-t. ...
- Adjunk hozzá gyorsan 1 ml-t. ...
- A tejet és a festéket 2-3-szor megfordítva alaposan összekeverjük.
- Helyezze a csöveket a 37,5 0 C-os vízfürdőbe csak két percre.
- Ezután a csöveket eltávolítjuk a vízfürdőből.
Mi okozza a színváltozást a resazurin tesztben?
A változás sebessége a baktériumtartalmat jelzi. A terméket a Mezőgazdasági, Halászati és Élelmiszerügyi Minisztérium követelményeinek való megfelelőség szempontjából tesztelték. A tejből az oxigén eltávolítása és a bakteriális anyagcsere során redukáló anyagok képződése a szín eltűnését okozza.
Miért tesztelik az alkoholt a tejben?
Az alkoholtesztet friss tejen használják annak jelzésére, hogy a termikus feldolgozás során megalvad-e . Ez a vizsgálat különösen fontos UHT tej, párolt tej és tejpor gyártása során. Ez a teszt érzékenyebb, mint a Clot-on Boiling (COB) teszt.
A Resorufin vízben oldódik?
Ez a termék vízben oldódik (1 mg/ml), így sötét, vörös-lila oldatot kapunk.
Mi az MTT citotoxicitási vizsgálat?
Az MTT vizsgálatot a sejt metabolikus aktivitásának mérésére használják, mint a sejt életképességének, proliferációjának és citotoxicitásának indikátorát. ... Ez egy kvantitatív assay, amely lehetővé teszi nagyszámú minta gyors és kényelmes kezelését.