Hogyan működik a guanidin-hidroklorid?
Pontszám: 5/5 ( 9 szavazat )A guanidin-hidroklorid az Eaton-Lambert szindrómával összefüggő izomgyengeség és könnyű fáradékonyság tüneteinek csökkentésére javasolt. Nem javallott myasthenia gravis kezelésére. Úgy tűnik, hogy fokozza az acetilkolin felszabadulását idegimpulzus után.
Mi a guanidin-hidroklorid funkciója?
A guanidin-hidroklorid (GuHCl) egy kis hidroszkopikus molekula. Szerepet játszik a hősokk-fehérje 104 (Hsp104) adenozin-trifoszfatáz (ATPáz) aktivitásának gátlásában in vivo. Erőteljes denaturáló és számos enzim és fehérje inaktivátora. A GuHCl inaktiválhatja az aminoacilázt és a papaint.
A guanidin-hidroklorid megszakítja a diszulfidkötéseket?
Az oldószer minden esetben 6 M guanidin-hidroklorid volt, amely 0,1 vagy 0,2 M P-merkaptoetanolt tartalmazott, és amelyet úgy vittünk be, hogy megszakítsák a diszulfidkötéseket , ahol jelen vannak, vagy megakadályozzák azok kialakulását a tiolcsoportok lassú oxidációjával.
Miért tartalmaz a lízispuffer guanidin-hidrokloridot?
A guanidinium nagyon erős denaturálószer, így feloldja a sejteket és denaturálja az endogén RNS-eket.
Hogyan denaturálja a guanidium-tiocianát a fehérjéket?
A guanidinium-tiocianát-fenol oldat, amely a kereskedelemben TRIzol, TriFast vagy TRI Reagent néven kapható, szétroncsolja a sejteket, denaturálja a fehérjéket és deaktiválja a nukleázokat, ezáltal stabilizálja a DNS-t, az RNS-t és a fehérjét. ... Egy másik egyszerű módszer a forró savas fenol felhasználása RNS kinyerésére a mikroorganizmusokból.
A guanidin-hidroklorid általi fehérjedenaturáció mechanizmusának vizsgálata
A guanidin-tiocianát mérgező?
AZ OSHA 29 CFR 1910.1200 SZERINT VESZÉLYES ANYAGNAK. Savval érintkezve nagyon mérgező gázok képződnek. Belélegezve, bőrrel érintkezve és lenyelve ártalmas. Ártalmas a vízi szervezetekre, a vízi környezetben hosszan tartó károsodást okozhat.
A guanidin tiocianát?
A guanidin-tiocianát egy ultratiszta, molekuláris biológiai minőségű reagens . Kimutatható nukleáz- és proteázaktivitástól mentes, és erős fehérjedenaturáló, mivel mind a guanidinium-kation, mind a tiocianát anion kaotróp ágens. Egy 500 g-os üvegben kerül forgalomba.
Hogyan kell tárolni a guanidin-hidroklorid oldatot?
A guanidin·HCl oldatok szobahőmérsékleten több napig stabilak (hosszabb ideig 4°C-on tárolandó).
Miért használják a guanidin-izotiocianátot az RNS izolálására?
A guanidinium-tiocianátot sejtek és vírusrészecskék lízisére is használják RNS- és DNS-kivonatokban, ahol funkciója a lizáló hatáson kívül az RNáz enzimek és DNáz enzimek aktivitásának megakadályozása azok denaturálásával . Ezek az enzimek egyébként károsítanák a kivonatot.
Hogyan semlegesíthető a guanidin HCl?
A legegyszerűbb módja annak, hogy semlegesítse NaOH-val vagy más bázissal, például NaHCO3-val vízben . Ezt követően betöményítheti a kapott oldatot, és szerves oldószer feleslegével kicsaphatja az inioganikus sót (etanollal vagy más vízzel elegyedő szerves oldószerrel).
Hogyan hatnak a kaotróp szerek?
A kaotrop szer olyan vegyület, amely megszakítja a hidrogénkötést vizes oldatban, ami megnövekedett entrópiához (azaz „káoszhoz”) vezet. Általában ez csökkenti a hidrofób hatásokat, amelyek elengedhetetlenek a makromolekulák, például fehérjék és nukleinsavak háromdimenziós szerkezetéhez.
Hogyan készítsünk 6 m-es guanidin HCl-t?
- Készít. 100. 1000. ml 6 M guanidin-hidrokloridot úgy, hogy a gof guanidin-hidrokloridot feloldjuk ml dH 2 O-ban.
- Miután feloldódott, egészítse ki a térfogatot. 100. 1000. ml dH 2 O-val.
Hogyan denaturálja a karbamid fehérjét?
A fehérjéket a karbamid több folyamaton keresztül denaturálhatja. Az egyik módszer közvetlen kölcsönhatást foglal magában, amelynek során a karbamid hidrogénkötése polarizált töltési területekhez , például peptidcsoportokhoz kötődik. Ez a kölcsönös hatás gyengíti az intermolekuláris kötéseket és kölcsönhatásokat, gyengíti az általános másodlagos és harmadlagos szerkezetet.
Miért erős bázis a guanidin?
A töltés hatékony rezonanciastabilizálása és a vízmolekulák hatékony szolvatációja miatt rendkívül stabil +1 kation a vizes oldatban. Ennek eredményeként a pK aH értéke 13,6, ami azt jelenti, hogy a guanidin nagyon erős bázis a vízben; semleges vízben szinte kizárólag guanidiniumként létezik.
A guanidin-hidroklorid sav?
Erős szerves bázis , amely fiziológiás pH-n elsősorban guanidium-ionként létezik. A vizeletben a fehérjeanyagcsere normális termékeként található meg.
A guanidin-hidroklorid kaotróp só?
A guanidinium kloridsója (guanidin-hidroklorid, (C(NH 2 ) 3 ) + , erős kaotróp szer , amelyet fehérjék denaturálására és szolubilizálására használnak a hidrogénkötések megszakításával. RNS-izolálási eljárásokban is használják a nukleinsav- és fehérjerészek disszociálására.
Miért használnak izopropanolt az RNS extrakcióhoz?
Míg az izopropanol valamivel kevésbé hatékony az RNS kicsapásában , az izopropanol NH 4 + jelenlétében jobb, mint az etanol, hogy oldatban tartja a szabad nukleotidokat, és így elválasztja azokat a kicsapott RNS-től. Az RNS-kicsapás gyorsabb és teljesebb magasabb RNS-koncentráció esetén.
Hogyan választja el a TRIzol az RNS-t?
A minták TRIzol® -ban történő szolubilizálása és homogenizálása után az RNS-t, a DNS-t és a fehérjét differenciáltan extraháljuk fáziselválasztó reagens (kloroform, BCP vagy BAN) hozzáadásával . Az oldat az RNS-t a DNS-től és a fehérjétől különböző rétegekre választja el (1. ábra).
Hogyan oldjuk fel a guanidin-tiocianátot?
Oldjunk fel 120 g tiocianát-guanidint (GuSCN) 100 ml 0,1 M trisz-hidrokloridban (pH 6,4). A GuSCN feloldódását 60-65 °C-os vízfürdőben folyamatos rázatás mellett történő melegítés segítette elő. Az L2 pufferek legalább 3 hétig stabilak szobahőmérsékleten, sötétben.
A guanidin lejár?
A termék szobahőmérsékleten tárolva a gyártástól számított két évig stabil . Ne használja a termék címkéjén feltüntetett lejárati dátumot. 1.
Lehet autoklávozni a guanidin-hidrokloridot?
NE AUTOKLAVOZZON . Használjon 0,22 μm pórusú vákuumszűrőt (de ez is szűrés nélkül készült, így előfordulhat, hogy nem lesz rá szükség). 4°C-on tárolandó.
A guanidin-tiocianát szerves?
Guanidinium-tiocianátot, egy kaotrop szert adnak a szerves fázishoz, hogy elősegítsék a fehérjék denaturálódását (például azok, amelyek erősen kötik a nukleinsavakat vagy amelyek lebontják az RNS-t). A nukleinsavak (RNS és/vagy DNS) a vizes fázisba, míg a fehérjék a szerves fázisba osztódnak.
A guanidin-tiocianát sav vagy bázis?
guanidin-tiocianát (erős) bázisok .
A guanidin gátolja a PCR-t?
Minden válasz (3) Ha bármely GITC bevérzik a DNS-ébe (vagy valójában az RNS-be), ami 260/230 < 1,0 arány azt jelenti, hogy ez a kaotróp anyag határozottan gátolhatja az olyan eljárásokat (enzimeket), mint a PCR.
A trizol gyúlékony?
a. Bár nem olyan általánosan használtak, mint a fenti anyagok, egyes RNS-kivonási eljárások ennek az anyagnak a használatát javasolják. b. A 2- merkaptoetanol gyúlékony , maró hatású a bőrre és a szemre, bőrszenzibilizáló hatású (azaz allergiát okozhat), és belélegezve, lenyelve és különösen bőrön keresztül mérgező.