Hogyan működnek a radioligandumkötési vizsgálatok?
Pontszám: 4,7/5 ( 52 szavazat )Ezeket úgy hajtjuk végre, hogy a jelöletlen tesztvegyületet meghatározott koncentrációjú radioligandumokkal inkubáljuk, és megmérjük a tesztvegyület ICso -értékét (nM), hogy kompetitív módon gátolja a radioaktívan jelölt ligandum kötődését a receptorához.
Hogyan működnek a kompetitív kötési vizsgálatok?
A kompetitív kötődési vizsgálat jellemzően egy jelölt ligandum célfehérjéhez való kötődését méri egy második, versengő, de jelöletlen ligandum jelenlétében . ... Ez a vizsgálat megadja az EC 50 értéket , azt a koncentrációt, amely a jelölt molekula 50%-át kiszorítja a kötőhelyről.
Hogyan működik a radioligand?
Egy neuroimaging alkalmazás során a radioligandot a megfelelő szövetbe fecskendezik, vagy infúzióval a véráramba juttatják . A receptorához kötődik. Amikor a ligandumban lévő radioaktív izotóp lebomlik, azt pozitronemissziós tomográfiával (PET) vagy egyfoton emissziós számítógépes tomográfiával (SPECT) lehet mérni.
Mi az a kinetikus kötési vizsgálat?
Egy általánosított megközelítést javasolunk, amely egyesíti a kiváló minőségű kinetikai és egyensúlyi adatokat egy Integrated Global Fit elemzésben, amely a legvalószínűbb kötési mechanizmust eredményezi. ...
Mi az a receptorkötési vizsgálat?
A receptorkötési vizsgálatok hagyományosan a gyógyszerfejlesztés fő pillérei. Ezek a vizsgálatok a sejtmembránok egyszerű biológiai előkészítését és egy jelölt vegyületet alkalmaznak a membránokban lévő specifikus fehérjereceptorok megkötésére .
Specifikus és nem specifikus kötés
Az Elisa A ligandumkötési teszt?
Az ELISA vagy enzimkapcsolt immunszorbens vizsgálat enzimaktivitáson (például HRP-n vagy torma-peroxidázon) támaszkodik, hogy felerősítse a kimutatási jelet egy ligandumkötési vizsgálatban . A technológia rendkívül adaptálható és viszonylag olcsó, mivel nem igényel speciális felszerelést a szabványos mikrolemez-leolvasón kívül.
Mi az a kötési görbe?
Az oxigénkötési görbe egy olyan görbe, amely a frakcionált telítettséget mutatja az oxigénkoncentráció függvényében . Definíció szerint a frakcionált telítettség olyan kötőhelyek jelenlétét jelzi, amelyek oxigénnel rendelkeznek. A törttelítettség nullától (minden hely üres) egyig (minden hely kitöltve) változhat.
Hogyan számítod ki a kd kötést?
Becsülje meg a KD-t a kötési adatokból. KD csak az [L] koncentrációja, amely Y = 0,5-öt ad (félfrakcionált telítettség). – 1/KD . Ez egy hasznos transzformációja az eredeti hiperbolikus kötési görbének egy egyszerű egyenessé, amelyből a disszociációs állandó könnyen meghatározható.
Mi az a Kd és Ka?
Kd-t egyensúlyi disszociációs állandónak nevezzük. A reaktánsok és a termékek egyensúlyi koncentrációja egy egyensúlyi asszociációs állandóval (Ka) is jellemezhető, amely egyszerűen a Kd reciproka.
Hogyan számolja a kötési oldalakat?
a lineáris egyenlet log[F0-F]/F= n log[Q]+logK . olyan eredményeket ad, mint n (kötőhely száma) és K (kötési állandó).
Milyen módszerek vannak a megkötött és szabad radioligandum elkülönítésére egy kötési kísérletben?
A receptorokat tartalmazó membránpreparátumhoz kötött radioligandum mérése megköveteli a kötött radioligand és a szabad radioligand elválasztását, ami szűréssel, centrifugálással vagy egyensúlyi dialízissel érhető el.
Mik azok a radioligandumkötési vizsgálatok?
Robusztusságuk és érzékenységük miatt a radioligandumkötési vizsgálatokat tekintik aranystandardnak a ligandum célreceptorhoz való kötődésének affinitásának mérésére . ... A radioligand növekvő koncentrációjával hajtják végre, hogy közvetlenül mérjék a receptorkötés szintjét.
Mi az a radioligand terápia?
A radioligand terápia olyan célvegyületet kombinál, amely a daganatok által expresszált markerekhez és egy radioaktív izotóphoz kötődik, DNS-károsodást okozva, amely gátolja a tumor növekedését és replikációját. Ez a terápiás megközelítés lehetővé teszi a sugárzás célzott eljuttatását a daganatba, miközben korlátozza a környező normál szövetek károsodását.
Lehet egy gyógyszer ligandum?
Általában úgy tekintenek, hogy a gyógyszerek receptorokhoz kötődnek, és minden olyan vegyszert, amely a receptorokhoz kötődik, ligandumnak (pl. gyógyszereknek) nevezik. A ligandumot általában kisebbnek tekintik, mint a receptort; azonban bármi, ami specifikusan kötődik, ligandumnak tekinthető.
Mi az a KD gyógyszer?
A disszociációs állandó KD = 1/KB . A KD hasznos módszer a gyógyszer biológiai célpontja iránti affinitásának bemutatására. Ennek az az oka, hogy a KD szám gyorsan megmondja nekünk azt a gyógyszerkoncentrációt, amely szükséges ahhoz, hogy jelentős mennyiségű kölcsönhatás alakuljon ki a célfehérjével.
Mi az a kompetitív kötési görbe?
Mi az a kompetitív kötési görbe? A kompetitív kötődési kísérletek a jelölt ligandum egyetlen koncentrációjának kötődését mérik különböző koncentrációjú jelöletlen ligandum jelenlétében . ... A görbe teteje egy plató, amelynek értéke megegyezik a radioligandum kötődésével a versengő jelöletlen gyógyszer hiányában.
Mi az a magas KD?
A kötési affinitás (kötőerő) mértéke – a molekula azon tendenciája, hogy egy adott kötőpartnerhez tapad, és megragad. ... Tehát a magasabb Kd azt jelenti, hogy amikor molekuláris összeírást végez, több a kötetlen molekula , míg az alacsonyabb Kd azt jelenti, hogy több kötött molekulát talál.
K és Ka ugyanaz?
A Ka sáv 33,4 és 36,0 GHz közötti radarhullámokból áll. Sajnos a radardetektort használók számára a Ka sáv valamivel összetettebb, mint az X és K sáv. Míg az X és K sávos rendőrségi radarfegyverek csak egy vagy két frekvencián működnek, a KA sávos fegyverek akár öt frekvencián is működnek.
Mit jelent a magas Ka érték?
Az erős savaknak kiemelkedően magas a Ka értéke. ... Minél magasabb a Ka, annál jobban disszociál a sav. Így az erős savaknak jobban kell disszociálódniuk a vízben. Ezzel szemben egy gyenge sav kevésbé valószínű, hogy ionizálódik és hidrogéniont szabadít fel, így kevésbé savas oldatot eredményez.
Mi a különbség a KM és a KD között?
Főbb különbség – Kd vs Km A Kd és Km közötti fő különbség az, hogy Kd termodinamikai állandó, míg Km nem termodinamikai állandó . A Kd a disszociációs állandóra utal, míg a Km a Michaelis-állandó. Mindkét állandó nagyon fontos az enzimreakciók kvantitatív elemzésében.
Mi az alacsony Kd érték?
- Alacsony affinitás: Kd nagyobb, mint 10 - 4 (> 100 mikroM) - Mérsékelt affinitás: Kd 10 - 4 és 10 - 7 között (100 mikroM - 100 nM) - Nagy affinitás: Kd kisebb, mint 10 - 7 (< 100 nM)
Miért negatív a kötési affinitás?
A fizikai rendszerben lévő energiát, amely munkára alakítható, szabad energiának nevezzük. A célfehérje aktív helyéhez kötődő kis molekulákat kötési affinitásnak nevezzük. ... A kedvező reakció szabad energiája negatív .
Mit jelent az N a ligandumkötésben?
Legyen n az egyes receptormolekulák ligandumkötő helyek száma, és n jelölje a receptorhoz kötődő ligandumok átlagos számát . Jelölje K d a ligandum és a receptor közötti disszociációs állandót.