Rekombináns fehérje expresszióval?
Pontszám: 4,8/5 ( 63 szavazat )Az ilyen DNS-templátokból előállított fehérjéket rekombináns fehérjéknek nevezzük. A rekombináns fehérje expressziójának hagyományos stratégiái a sejtek transzfektálását tartalmazzák egy DNS-vektorral, amely tartalmazza a templátot, majd a sejteket úgy tenyésztik , hogy átírják és lefordítsák a kívánt fehérjét.
Milyen expressziós rendszereket használnak a rekombináns fehérjetermeléshez?
A bakulovírus expressziós vektorrendszert (BEVS) rekombináns fehérjék termelésére használják rovarsejtekben. A rovarsejteket a kívánt sejtsűrűségig növesztjük, majd megfertőzzük a kérdéses gént tartalmazó rekombináns bakulovírussal (Owczarek et al., 2019).
Melyek a közös promóterek a rekombináns fehérje expressziójához E coli-ban?
A T7 promotert tartalmazó pET expressziós rendszer messze a legszélesebb körben használt rendszer heterogén expresszióra E. coliban [57]. A T7 promóter aktivitása erős, és egy rekombináns fehérje az összes sejtfehérje akár 50%-át is felhalmozhatja [58].
Hogyan növelheti a rekombináns fehérje expresszióját?
Öt szintű stratégia használható a túlzottan expresszált fehérje expressziójának és oldhatóságának növelésére; (1) a vektor megváltoztatása, (2) a gazdaszervezet megváltoztatása, (3) a rekombináns gazdatörzs tenyésztési paramétereinek megváltoztatása, (4) más gének koexpressziója és (5) a génszekvenciák megváltoztatása, ami segíthet növelni a . ..
Hogyan működik a fehérje expressziója?
A fehérje expressziója a baktériumokban meglehetősen egyszerű; Az Ön érdeklődésére számot tartó fehérjét kódoló DNS-t beépítik egy plazmid expressziós vektorba, amelyet azután baktériumsejtté transzformálnak . A transzformált sejtek szaporodnak, indukálják őket, hogy termeljék a kívánt fehérjét, majd lizálódnak.