Mi az indirekt immunfluoreszcencia elve?

A másodlagos (indirekt) immunfluoreszcencia két antitestet használ; a jelöletlen első (elsődleges) antitest specifikusan megköti a célmolekulát , a fluorofórt hordozó másodlagos antitest pedig felismeri az elsődleges antitestet és kötődik hozzá. Egyetlen elsődleges antitesthez több másodlagos antitest is képes megkötni.

Mi a különbség a direkt és a közvetett immunfluoreszcencia között?

A direkt és a közvetett immunfluoreszcencia közötti kulcsfontosságú különbség az, hogy a közvetlen immunfluoreszcencia egyetlen antitestet használ, amely a kívánt célpont ellen dolgozik, míg a közvetett immunfluoreszcencia két antitestet használ a kívánt cél megjelölésére.

Hogyan észlelhető az immunfluoreszcencia?

Az immunfluoreszcencia vizsgálat (IFA) egy standard virológiai technika az antitestek jelenlétének azonosítására a fertőzött sejtekben expresszált vírusantigénekkel való specifikus reakcióképességük alapján ; a megkötött antitesteket fluoreszcensen jelölt antihumán antitesttel való inkubálással teszik láthatóvá.

Mire használják a direkt immunfluoreszcenciát?

A közvetlen immunfluoreszcencia (DIF) egy olyan technika, amelyet laboratóriumban használnak a bőr, a vese és más szervrendszerek betegségeinek diagnosztizálására . Közvetlen immunfluoreszcens tesztnek vagy elsődleges immunfluoreszcenciának is nevezik.

Hogyan végezzük az immunfluoreszcenciát?

Melyek az immunfluoreszcens vizsgálat hátrányai?

A jelölt második antitesteket kényelmesen beszerezhetjük. Az indirekt immunfluoreszcencia hátránya a potenciális keresztreaktivitás, amely jelzett primer antitestet talál, amelyet nehezebb megszerezni, különösen többszörös jelölési kísérletek esetén.

Mik az immunfluoreszcencia előnyei?

Az immunfluoreszcencia előnye a fluoreszcens fehérjék élő képalkotásával szemben, hogy nagyszámú mintát lehet egyszerre kezelni és bizonyos ideig tárolni .

Mi a közvetlen immuncitokémia?

Az immuncitokémia (ICC) egy technika a fehérjék vagy más antigének kimutatására és megjelenítésére sejtekben, olyan antitestek felhasználásával, amelyek specifikusan felismerik a kívánt célpontot. Az antitest közvetlenül vagy közvetve egy riporterhez, például fluoroforhoz vagy enzimhez kapcsolódik .

Hogyan működik a közvetett ELISA?

Az indirekt ELISA egy olyan technika, amely kétlépcsős kimutatási folyamatot használ, amelynek során az antigénre specifikus elsődleges antitest kötődik a célponthoz, és az elsődleges antitest gazdafaja elleni jelölt másodlagos antitest kötődik az elsődleges antitesthez a kimutatáshoz.

Mi az a közvetlen és közvetett vizsgálat?

A direkt ELISA-k konjugált primer antitestet használnak, míg a közvetett ELISA-k egy további amplifikációs lépést is tartalmaznak. Egy közvetett ELISA-ban egy nem konjugált primer antitest kötődik az antigénhez, majd egy jelölt másodlagos antitest, amely az elsődleges antitest gazdafaja ellen irányul, kötődik az elsődleges antitesthez.

Mi az indirekt immunoassay?

Az indirekt ELISA egy kétlépcsős ELISA, amely két kötődési folyamatot foglal magában: elsődleges antitest és jelölt másodlagos antitest . Az elsődleges antitestet az antigénnel inkubáljuk, majd a másodlagos antitesttel inkubáljuk. ... Az antitesteket tartalmazó mintákat hozzáadjuk és megmossuk.

Mi a különbség a fluoreszcencia és az immunfluoreszcencia között?

Az immunfluoreszcencia azt jelzi, hogy fluoreszcens jelölést használtak a kérdéses marker megjelenítésére, de a fluoreszcens markerek használhatók immuncitokémiához (sejtek) vagy immunhisztokémiához (szövetek). ... Az immunfluoreszcenciát tenyésztett sejtvonalakon, szövetmetszeteken vagy egyedi sejteken lehet alkalmazni.

Mi az IFA teszt?

Az IFA egy olyan vizsgálati eljárás, amely fluoreszcens mikroszkópot használ a specifikus antigénanyag elleni antitestek kimutatására . Ezt a tesztet gyakran használják az ELISA (Enzyme Linked Immunorbent Assay) vagy az MFIA® (Multiplexed Fluorometric ImmunoAssay®) pozitív eredmények megerősítésére.

Az IFA ugyanaz, mint az Elisa?

Az indirekt immunfluoreszcencia vizsgálat (IFA) a Q-láz diagnosztizálásának referenciamódszere , de a szerológiát komplementkötési vizsgálattal (CFA) vagy enzim-linked immunoszorbens assay-vel (ELISA) is végzik.

Össze lehet keverni két elsődleges antitestet?

Mivel az elsődleges antitest az epitópját a variábilis doménjével köti meg, mivel; a másodlagos antitest konstans doménjéhez kötődik, semmi ok arra, hogy e két antitest összekeverése megzavarja a kötődést.

Mi az indirekt zsír?

Az indirekt FAT (IFAT) technika kórokozó-specifikus monoklonális vírusellenes antitestet (MAb) használ elsődleges antitestként (általában egér IgM), és fluoreszcein-izotiocianáttal (FITC) konjugált antiszérumot (általában kecske vagy nyúl anti-egér IgG-t) használ az alkalmazott immunglobulinhoz. az elsődleges antitesthez.

Mi a célja az indirekt immunfluoreszcens tesztnek?

Az indirekt immunfluoreszcenciát vagy másodlagos immunfluoreszcenciát laboratóriumokban alkalmazzák a páciens szérumában keringő autoantitestek kimutatására . Autoimmun hólyagos betegségek diagnosztizálására használják.

Mi a különbség az Elisa és az immunfluoreszcencia között?

Az egykor aranystandardnak tartott immunfluoreszcens technikát (IF) az ELISA egyre inkább kiszorítja . Az ELISA teljesen automatizálható, és az értelmezés nem igényli az IF-ben szükséges széleskörű tapasztalatot.

Mi a közvetlen és közvetett címkézés?

A közvetlen jelölés (balra) egy fluoreszcens markerrel megjelölt antitestet használ a célantigének jelölésére, míg a közvetett jelölés (jobbra) a markerekkel jelölt másodlagos antitesteket a célantigénhez kötődő elsődleges antitest megcélzására.

Miért használják az immuncitokémiát?

Miután az antitestek a sejtmintában lévő antigénhez kötődnek, az enzim vagy festék aktiválódik, és az antigén mikroszkóp alatt látható. Az immuncitokémiát betegségek, például rák diagnosztizálására használják . Használható arra is, hogy különbséget tegyen a különböző ráktípusok között.